Журнал судебной токсикологии и фармакологии

Метод MRM с быстрым разбавлением и инъекцией потока для количественного определения EtG в моче

Алагандула Р. и Го Б.

Количественное определение этилглюкуронида (EtG, метаболита и биомаркера этанола) в моче представляет большой интерес как для судебно-медицинской экспертизы, так и для клинических применений. В настоящее время один запуск ЖХ-МС/МС позволяет количественно определить подавляющее большинство наркотиков и наркотических веществ, включенных в панель комплексного тестирования мочи на наркотики (UDT), но EtG необходимо количественно определить в отдельном запуске, поскольку EtG является полярным, что ограничивает пропускную способность современных методов на основе МС. В этом исследовании мы разработали простой и быстрый метод MRM для количественного определения EtG в моче без разделения ЖХ. Вкратце, образец мочи, содержащий EtG, сначала разбавляют в 20 раз, после чего осуществляют прямой впрыск потока разбавленного образца в источник ESI. Количественное определение EtG было достигнуто с помощью мониторинга множественных реакций (MRM), работающего в отрицательном режиме со стабильным изотопом, маркированным EtG, в качестве внутреннего стандарта. Метод полностью проверен и имеет динамический диапазон 50-2000 нг/мл (R2>0,998). Коэффициенты вариации и относительные ошибки для меж- и внутрианализных исследований находились в диапазоне 2,4-4,2% соответственно. Кроме того, был проведен тест на надежность с >1200 инъекциями образцов мочи, и не было отмечено никаких существенных ухудшений чувствительности и специфичности. Этот новый метод имеет общее время выполнения всего 2 мин на образец, что позволяет анализировать >700 образцов в день одним масс-спектрометром.