Журнал исследований фармацевтики и доставки лекарств

Флударабин- (C2-метилгидроксифосфорамид)- [анти-IGF-1R]: синтез и селективно направленная противоопухолевая цитотоксичность против легочной аденокарциномы (A549)

Coyne CP и Лакшми Нараянан

Флударабин- (C2-метилгидроксифосфорамид)-[анти-IGF-1R]: синтез и селективная «таргетная» противоопухолевая цитотоксичность против легочной аденокарциномы (A549)

Введение: Многие, если не большинство обычных химиотерапевтических препаратов с малым молекулярным весом, обладают высокой эффективностью против многих форм неопластических заболеваний. К сожалению, большая часть введенной дозы непреднамеренно пассивно диффундирует в нормальные ткани и здоровые системы органов после внутривенного введения. Одной из стратегий как для повышения эффективности, так и для снижения ограниченных дозой последствий является селективная «целевая» доставка обычных химиотерапевтических препаратов.

Материалы и методы: Флударабин-(C2-метилгидроксифосфорамид)-[анти-IGF-1R] был синтезирован путем первоначальной реакции флударабина с карбодиимидом с образованием промежуточного фосфатного эфира карбодиимида флударабина, который впоследствии реагировал с имидазолом с образованием аминореактивного флударабина-(C2-фосфорилимидазолида) промежуточного соединения. Моноклональный анти-IGF-1R иммуноглобулин был объединен с аминореактивным флударабином-(C2-фосфорилимидазолидом) промежуточным соединением, что привело к синтезу ковалентного флударабина-(C2-метилгидроксифосфорамид)-[анти-IGF-1R] иммунохимиотерапевтического препарата . Остаточный флударабин и непрореагировавшие реагенты удаляли путем серийной микрофильтрации (MWCO 10 000) и контролировали с помощью аналитической ВЭЖХ-ТСХ. Сохраненная авидность связывания IGF-1R флударабина-(C2-метилгидроксифосфорамида)-[анти-IGF-1R] была установлена ​​с помощью клеточного ИФА с использованием клетки легочной аденокарциномы (A549), которая сверхэкспрессирует IGF-1R и EGFR. Противоопухолевая цитотоксическая активность флударабина-(C2-метилгидроксифосфорамида)-[анти-IGF-1R] была определена против легочной аденокарциномы (A549) с использованием методологии окрашивания на основе МТТ.

Результаты: Молярный индекс включения флударабина для флударабина-(C2-метилгидроксифосфорамид)-[анти-IGF-R1] составил 3,67:1, в то время как нековалентно связанный флударабин не был обнаружен с помощью аналитической шкалы HP-TLC после серийной микрофильтрации. Разделение по размеру флударабина-(C2-метилгидроксифосфорамид)-[анти-IGF-1R] с помощью SDS-PAGE с хемолюминесцентной авторадиографией обнаружило только одну полосу 150 кДа. Клеточный ИФА флударабина-(C2-метилгидроксифосфорамид)-[анти-IGF-1R], измеряющий общий иммуноглобулин, связанный с внешними поверхностными мембранами легочной аденокарциномы (A549), увеличивался с повышением