Журнал исследований фармацевтики и доставки лекарств

Разработка и валидация хроматографического метода количественного определения изониазида в плазме человека

Альшайхейд М, Фредж Н.Б., Шаабан А, Чадли З, Слама А, Бугаттас Н, Лассуед М.А., Ауам К.

Цель: Изониазид (INH) является основным противотуберкулезным средством, характеризующимся узким терапевтическим индексом и большой внутри- и межпациентной вариабельностью. Таким образом, терапевтический лекарственный мониторинг (TDM) этого препарата является обязательным для оптимизации эффективности и минимизации возникновения токсических побочных эффектов этого препарата. Целью настоящего исследования является разработка и валидация простого хроматографического метода определения INH в плазме человека.

Методы: Высокоэффективная жидкостная хроматография проводилась с использованием хроматографа Ultimate 3000®. Извлечение INH из плазмы осуществлялось с использованием трихлоруксусной кислоты (ТХУ). В качестве внутреннего стандарта (ВС) использовался никотинамид. Подвижная фаза состояла из буферного раствора ацетата аммония (99%) 0,05 М, доведенного ледяной уксусной кислотой до pH 6 (99%), и ацетонитрила (1%). Хроматографическое разделение достигалось на колонке C18 (5 мкм, 4,6 x 150 мм) при 20 °C. Сигналы контролировались с помощью диодного матричного детектора (ДМД) при длине волны (λ) 265 нм, при скорости потока 1,2 мл/мин.

Результаты: Время удерживания INH и IS составило 6,4 и 10,5 соответственно. Пределы обнаружения и количественного определения INH составили 0,09 и 0,3 мкг/мл соответственно. Данный метод является специфическим и линейным в диапазоне от 0,5 до 8 мкг/мл с коэффициентом регрессии 0,998. Кроме того, данный метод является точным и аккуратным, как показывают соответствующие статистические тесты, рекомендованные для проверки биоаналитических методов.

Заключение: Мы разработали и проверили простой, быстрый и удобный метод определения ИНГ в плазме у больных туберкулезом, получающих это лечение.