Журнал молекулярной биологии и методов

Сравнение определения пола плода крысы с использованием плацентарной геномной ДНК и мРНК с помощью ОТ-ПЦР

Энтони Л. Су и Рита Лох-Карузо

Растет потребность рассматривать пол плода как биологическую переменную и точно оценивать эффекты, специфичные для пола. Среди множества методов, используемых для определения пола плода, обычно используется количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени (qRT-PCR) Sry (полоопределяющий регион Y) с геномной ДНК (gDNA) в дополнение к использованию таких методологий, как транскриптомика и обнаружение тельца Барра. Однако информационная РНК Sry (мРНК), продукт SrygDNA, ранее не оценивалась для определения пола. Используя образцы плаценты от крыс Wistar с установленным сроком беременности на 16-й день гестации (GD), это исследование оценило совместимость обнаружения Sry с использованием gDNA и мРНК для определения пола плода. Образцы, используемые в этом текущем исследовании, взяты из более крупного исследования, в котором изучалась репродуктивная токсичность трихлорэтилена (TCE) и потенциальная модуляция N-ацетил-L-цистеином (NAC) и аминооксиуксусной кислотой (AOAA). В 90 из 91 образца классификация пола, определенная с помощью генной ДНК, совпадала с классификацией пола, определенной с помощью анализа значений Sry (Sry/B2m) мРНК. Как для генной ДНК, так и для мРНК статистически значимые различия в значениях Sry/B2m между самцами и самками наблюдались при рассмотрении образцов в совокупности и при разделении образцов по группам лечения (все сравнения были p < 0,01 или ниже, и все, кроме двух сравнений, были p < 0,001 или ниже). Наконец, также обсуждалась обоснованность использования значений SryCq для определения пола плода и референсного гена B2m. В совокупности это исследование предполагает, что определение пола плода у крыс Wistar может быть выполнено с использованием измерений Sry в генной ДНК или мРНК с высокосовместимыми результатами.