Журнал наноматериалов и молекулярных нанотехнологий

Получение антиэластаза антител, конъюгированных с квантовыми точками 710 Нм и флуоресцеинизотиоцианатом, для иммуноанализа соматических клеток молока

Златина Бечева и Цонка Годжеваргова

Получение антиэластаза антител, конъюгированных с квантовыми точками 710 Нм и флуоресцеинизотиоцианатом, для иммуноанализа соматических клеток молока

Разработан новый метод иммунофлуоресцентной микроскопии для подсчета нейтрофилов и соматических клеток с использованием антитела против эластазы. Были приготовлены два различных конъюгата - конъюгат антитела против бычьей эластазы нейтрофилов с изотиоцианатом флуоресцеина и конъюгат антитела против бычьей эластазы нейтрофилов с квантовыми точками 710 нм. Связывание квантовых точек (КТ) и изотиоцианата флуоресцеина (ФИТЦ) с антителом было продемонстрировано путем сравнения спектров поглощения ультрафиолета и спектров флуоресценции конъюгата и исходных компонентов. Активность конъюгатов измеряли с помощью непрямого ИФА при тех же условиях. Было обнаружено, что чувствительность иммуноанализа с конъюгатом КТ была выше, чем чувствительность иммуноанализа с конъюгатом ФИТЦ. Изучалась стабильность хранения конъюгата антитела к бычьей нейтрофильной эластазы-QDs710nm и конъюгата антитела к бычьей нейтрофильной эластазы-FITC. Остаточная интенсивность флуоресценции антитела к эластазы-QDs составляла 95% на 30-й день, в то время как интенсивность конъюгата антитела к эластазы-FITC снизилась до 60% в тот же день. Полученные конъюгаты были применены в реальном тесте с соматическими клетками коровьего молока. Флуоресцентная визуализация доказала, что конъюгат QDs имеет лучшую интенсивность флуоресценции, чем конъюгат FITC, и больше подходит для определения соматических клеток в молоке.