Венкатесан Г*, Кушваха А, Кумар А, Пулинлу Г, Карки М, Сасикумар П
Петлевая изотермическая амплификация (LAMP) — это простой, быстрый, недорогой, чувствительный и специфичный анализ амплификации нуклеиновых кислот при постоянной температуре в водяной бане/тепловом блоке с использованием ДНК-полимеразы Bst. Существует потребность в недорогом, надежном диагностическом методе в качестве альтернативы анализам ПЦР и ПЦР в режиме реального времени. Анализ LAMP оказался в 10–100 раз более чувствительным, чем ПЦР. В этом методе используются четыре специально разработанных праймера, способных распознавать шесть различных областей в целевой ДНК, что обеспечивает чрезвычайно высокую специфичность. Существует несколько методов обнаружения, доступных для реакций амплификации в закрытых пробирках в одном сосуде, чтобы минимизировать/контролировать загрязнение переносимым материалом во время открытия амплифицированных пробирок. Метод LAMP используется в клинической диагностике патогенов, включая вирусы, и других приложениях, а именно типировании полиморфизма одного нуклеотида (SNP), проверке фальсификации мяса и обнаружении ГМО, определении пола, обнаружении пестицидов, обнаружении опухолей и количественной оценке шаблонной ДНК. Как метод LAMP с закрытой трубкой, LAMP может использоваться в качестве полевого диагностического инструмента в условиях ограниченных ресурсов, где диагностическое тестирование может быть нецелесообразным. В этом обзоре особое внимание уделяется принципу LAMP, методам обнаружения, модификациям LAMP, преимуществам по сравнению с обычной молекулярной диагностикой и его применению в ветеринарии.