Журнал ветеринарных наук и медицинской диагностики

Разработка и характеристика эффективности метода ИФА с двойным антигеном для обнаружения антител к Mycoplasma bovis

Хайфэн Ло, Яньань Го, Пэн Сунь, Шуцян Го, Шэнху Хэ, Пин Чжао, Лянбэй Кэ и Хэпин Чжан

Аннотация
Предыстория: Mycoplasma (M.) bovis является важным патогеном крупного рогатого скота, который связан с возникновением многих. В настоящее время не существует эффективной вакцины для предотвращения инфекций M. bovis, и
в настоящее время нет коммерческих вакцин, поэтому подход к обнаружению показывает важность для контроля заболевания и наблюдения за распространенностью M. bovis.
Цель: Разработать и оптимизировать ИФА и оценить аналитическую, диагностическую и эпидемиологическую эффективность.
Животные: Полевые образцы сыворотки (n=368) с 9 ферм крупного рогатого скота в разных округах провинции Нинся, Китай.
Методы: Были сравнены различные принципы обнаружения антител ИФА, и оптимизированы параметры двойного антигенного сэндвича (DAS) ИФА с рекомбинантным антигеном P48. Все
образцы сыворотки были протестированы с помощью DAS ELISA и референсного набора. Точность, чувствительность и специфичность были оценены с помощью ROC-кривой, а для анализа распространенности и эпидемиологической эффективности использовался ящик-плот
.
Результаты: Анализ ROC-кривой для DAS ELISA показал, что площадь под кривой составила 0,807 (p < 0,001). При отсечке OD 1,5 диагностическая чувствительность составила 69,16% (95% доверительный интервал [ДИ], 59,5% - 77,7%) с диагностической специфичностью 72,8% (95% ДИ, 67,0% - 78,1%). Было обнаружено 6 из 9 ферм, инфицированных M. bovis, а уровень релевантности составил 81,43%, 75,00%, 65,79%, 33,33%, 38,64% и 72,84% с DAS ELISA соответственно, выше, чем 50,00%, 50,00%, 28,95%, 3,33%, 29,55, 40,74% с референтным набором.

Выводы: Оптимизированный DAS ELISA обеспечил однозначное улучшение серодиагностических показателей и достаточную чувствительность, специфичность и станет усовершенствованным инструментом для наблюдения
и профилактики M. bovis.