Журнал ветеринарных наук и медицинской диагностики

Выявление Mycoplasma Spp. в клеточных культурах с помощью протокола родоспецифической полимеразной цепной реакции

Клаудия Ф. Лобос, Мария А. Мартинес и Карлос О. Наварро

Заражение клеточных культур Mycoplasma spp. усложняет базовое исследование и разработку биологических продуктов. Воздействие этих бактерий на культивируемые клетки заключается в изменении метаболизма, иммунологических и биохимических свойств, роста, жизнеспособности и т. д. Инфекция Mycoplasma spp. клеточных культур может
быть не обнаружена визуальным осмотром или обычной микроскопией. Следовательно, важно проводить регулярные периодические оценки с использованием высокочувствительного и высокоспецифичного быстрого метода. Что касается предыдущего утверждения, эти мемуары были основаны на молекулярной диагностике Mycoplasma spp. путем обнаружения гена 16S рРНК с помощью обычной техники полимеразной цепной реакции на образцах клеточных культур из разных лабораторий Чилийского университета и Института общественного здравоохранения Чили. Результаты, полученные в положительных и отрицательных контролях, позволили провести валидацию этого метода на факультете ветеринарных наук и применить его к подозрительным образцам из Института биомедицинских наук Чилийского университета. Это открытие было подтверждено путем выравнивания нуклеотидных последовательностей с использованием программного обеспечения Clustal Ω и BLAST (оба являются бесплатными онлайн-программами), что дало 97% процентной идентичности нуклеотидов относительно Mycoplasma spp. из GeneBank®.