Международный журнал сердечно-сосудистых исследований

Деносумаб может быть потенциальным ингибитором кальцификации интерстициальных клеток клапанов in vitro

Дэниел Алехандро Лерман, Саи Прасад и Насри Алотти

Деносумаб может быть потенциальным ингибитором кальцификации интерстициальных клеток клапанов in vitro

Цель: Деносумаб — это полностью человеческое моноклональное антитело и новый антирезорбтивный агент, который действует путем связывания рецепторного активатора лиганда ядерного фактора каппа-β (RANKL) и ингибирования каскада сигналов, который вызывает созревание, активность и выживание остеокластов. Мы стремились выяснить влияние Деносумаба на процесс спонтанной и индуцированной кальцификации в модели in vitro свиных клапанных интерстициальных клеток (VIC).

Материалы и методы: VIC были извлечены из свежих свиных сердец путем серийного переваривания коллагеназой. Спонтанная кальцификация VIC была увеличена in vitro путем добавления Na ₃ PO ₄ (3 мМ, pH 7,4) и различных концентраций (0,1, 1 и 10 нг/мл) трансформирующего фактора роста бета (TGFß). Степень кальцификации до и после лечения деносумабом оценивалась путем окрашивания ализарином красным для отложения кальция и сириусом красным для коллагена. Колориметрические методы использовались для количественного определения отложения кальция и коллагена. Для статистического анализа мы использовали SPSS и Microsoft Office Excel 2013.

Результаты: Свиные аортальные VIC in vitro были вызваны к кальцификации добавлением либо 3 мМ Na ₃ PO ₄ , что показало 5,2-кратное увеличение к 14 дню (P < 0,001), либо 3 мМ Na ₃ PO ₄ + 10 нг/мл TGFβ, что показало 7-кратное увеличение к 14 дню (P < 0,001). Деносумаб ингибировал индуцированную кальцификацию 3 мМ Na ₃ PO ₄ и 3 мМ Na ₃ PO ₄ с добавлением TGFß в концентрации 0,1, 1 или 10 нг/мл к базальным уровням только при концентрации 50 мкг/мл (P < 0,001).

Заключение: Это исследование доказало, что Деносумаб может быть потенциальным ингибитором кальцификации VICs in vitro . Более полное понимание действия Деносумаба может определить новую терапевтическую стратегию для клинического вмешательства против кальцификации аортального клапана и аортального стеноза .