Журнал ветеринарных наук и медицинской диагностики

Сравнение трех альтернативных методов выявления резистентности к бензимидазолу у желудочно-кишечных нематод коз

АК Диксит, Джи Дас и Пуджа Диксит

Настоящее исследование было запланировано с целью изучения статуса резистентности к бензимидазолу у желудочно-кишечных нематод коз на ферме Аманала, Джабалпур, с использованием теста на снижение количества фекальных яиц in vivo (FECRT), анализа вывода яиц in vitro (EHA) и молекулярного теста - аллель-специфической ПЦР (AS-PCR). FECRT и анализ вывода яиц проводились, как описано Coles et al. (2006). AS-PCR проводилась в соответствии с Chandra et al. (2015) с небольшими модификациями. В тесте FECR фенбендазол снижал количество фекальных яиц на 23% с более низким доверительным интервалом ¬-32%. Haemonchus contortus, Trichostrongylus spp., Oesophagostomum spp., Strongyloides spp. и Bunostomum spp. личинки были идентифицированы в культурах фекалий до обработки, но последующее копрокультурирование выявило H. contortus (92%) как основную нематоду, проявляющую резистентность, за которой следовал Oesophagostomum spp. (8%). Значение эффективной дозы (ED50) 0,335 мкг/мл тиабендазола подтвердило существование нематод, устойчивых к бензимидазолу, в анализе вылупления яиц. В молекулярном тесте размер гнездового ампликона ПЦР составил около 820 пн, а фрагменты, переваренные RsaI RFLP, показали основные фрагменты в 550 пн, 170 пн и 100 пн. Размер восприимчивого аллель-специфического гена, устойчивого аллель-специфического гена и неаллель-специфического гена составил 603 пн, 222 пн и 774 пн соответственно. Результаты AS-PCR показали, что 62% личинок H. contortus были гомозиготными устойчивыми (rr), 24% гетерозиготными (rS) и 14% гомозиготными восприимчивыми (SS). Распространенность аллеля устойчивости к бензимидазолу (r) также была значительно (p<0,01) выше (74%) по сравнению с восприимчивым аллелем (S) (26%). Хотя результаты всех тестов указывали на наличие нематод, устойчивых к бензимидазолу, FECRT выявил род устойчивых нематод, тогда как AS-PCR также выявил генотипы (rr, rS, SS) популяции H. contortus.