Журнал иммунологических методов и инфекционных заболеваний

Иммуноферментный анализ с использованием флуоресцентных микросфер для выявления антител к вирусу репродуктивно-респираторного синдрома свиней и цирковирусу свиней типа 2 с использованием белка А, белка G и белка A/G

Мохаммад М. Хоссейн и Рэймонд Р.Р. Роуленд

Целью данного исследования была разработка мультиплексного флуоресцентного микросферического иммуноанализа (FMIA) для обнаружения специфических антител IgG к вирусу репродуктивного и респираторного синдрома свиней (PRRSV) и цирковирусу свиней типа 2 (PCV2) путем включения неспецифических для вида конъюгатов белков A, G и A/G вместо вторичных антител. Всего было протестировано 205 образцов сыворотки, полученных от свиней, экспериментально инфицированных PRRSV и/или PCV2. Для получения рекомбинантных антигенов нуклеопротеин PRRSV (N) и капсидный белок PCV2 (CP) были экспрессированы в Escherichia coli и очищены на никелевой аффинной колонке. Очищенные белки были ковалентно связаны с карбоксилированными микросферическими шариками. Четыре целевых антигена были собраны в один мультиплекс и протестированы против сыворотки свиней, инфицированных или коинфицированных PRRSV или PCV2. Белки A, G и A/G были протестированы вместо вторичного конъюгата свиного IgG. Все конъюгаты были способны обнаруживать антитела, а обнаружение ответов IgG против антигенов PRRSV и PCV2 варьировалось с A> A/G> G. При отсутствии видоспецифических реагентов включение белков A, G и A/G обеспечивает подходящую замену.